Nanoprobes丨GoldiBlot 用于 His-tag 检测方案

如果你厌倦了冗长的蛋白质印迹实验方案，可以看看艾美捷 Nanoprobes GoldiBlot TM，这是Nanoprobes在蛋白质印迹和其他免疫印迹中检测 His 标签蛋白的新系统。黄金印迹是一种新型检测系统，可在一小时内对任何带有多组氨酸标签的蛋白质提供纳克级检测灵敏度。它基于Nanoprobes的 Nickel(II)-NTA-gold（次氮基三乙酸 - Ni(II) - 金）技术，结合快速自动金相放大，其中金属选择性地沉积在结合的金颗粒上。下面显示了原理，以及在蛋白质印迹中对带 His 标签的蛋白质进行染色所获得的结果。与用于有机显色剂的金属增强工艺不同，这可以产生干净、清晰的信号，而无需额外的试剂或步骤。

左图：使用 GoldiBlot TM HIS 蛋白检测试剂盒对 His 标签蛋白进行蛋白质印迹检测。泳道 M：全蓝蛋白阶梯。泳道 1-5：His 标记的 ATF-1 以 2.5、50 ng ( 1 ) 50 ng、( 2 ) 25 ng、( 3 ) 10 ng、( 4 ) 5 ng 和 ( 5 ) 2.5 ng 加载。( 6 ) 100 ng His 标记的 YY1。( 7 ) 100 ng His 标记的 Src。( 8 ) 50 ng His-tagged Src 和细菌提取物，含 2,500 ng 总大肠杆菌蛋白。( 9 ) 含有 2,500 ng 总大肠杆菌蛋白的细菌提取物。

右图：GoldiBlot TM的工作原理：Ni-NTA-Gold 与带 His 标签的蛋白质结合，然后对金颗粒进行自动金相放大以使其可见。

Nanoprobes GoldiBlot TM的特点和优势包括：

1.在一小时内检测 His 标签蛋白。

2.洋红色条带中带 His 标签的蛋白质的直接可视化。不需要胶片、放射自显影或磷光成像仪。

比抗体更稳定。

3.低纳克级灵敏度和低背景。

4.不涉及抗体。

艾美捷 Nanoprobes GoldiBlot TM的应用包括：

1.快速、可靠地识别细胞裂解物和提取物中的 His 标签蛋白。

2.更快、更简单的蛋白质印迹。

3.确认转染细胞中他标记的报告蛋白的表达。

参考文献：

Dubendorff, J.; Cruz, M.; Gonzalez, C.; Hainfeld, J.; Liu, W.: Rapid Detection of His-tagged Proteins on Western Blots Proc. 47th Ann. Mtg., Amer. Soc. Cell Biol., 47; Pres. # 1918., poster # B265 (2007).

Abstract (courtesy of the American Society for Cell Biology).